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Dendrímeros basados en PAMAM derivatizado con grupos alquil sulfonilo

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Dendrímeros
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La  supuesta capacidad de la terapia génica para el tratamiento de enfermedades genéticas ha conducido a una gran actividad investigadora sobre el diseño de vectores para la administración de genes que sean capaces de compactar y proteger oligonucleótidos como DNA contra la degradación por DNasas presentes en el suero. Los vectores no virales constituyen una alternativa atractiva al uso de virus, retrovirus y adenovirus,  ya que resuelven problemas de los sistemas virales como la toxicidad, inmunogenicidad y los problemas de  obtención a gran escala de estos sistemas virales

La presente invención permite la obtención de compuestos ambifílicos derivados de PAMAM donde algunos grupos amino periféricos de estos dendrímeros se han unido a derivados de vinilsulfona conteniendo cadenas alquílicas hidrofóbicas de una forma altamente sencilla y eficaz a través de la reacción de adicion tipo aza-Michael de vinil sulfonas a grupos aminos.

Aunque las propiedades de transfección de los compuestos resultantes dependen de la naturaleza química de la cadena hidrofóbica y del grado de extensión de la modificación de superficie de los dendrímeros, algunos de los dendrímeros derivados PAMAM son vectores útiles para la transfección que poseen mejores propiedades que el PAMAM sin modificar o reactivos comerciales de transfección como la LipofectaMINA 2000: a) una mayor eficiencia de transfección, b) una menor citotoxicidad, c) la capacidad de mantener la transfección en presencia de suero y d) la posibilidad de transfectar distintos tipos de líneas celulares.

Igualmente se describe la preparación de sondas fluorescentes para monitorizar las rutas de endocitosis útiles en la transfección mediada por estos dendrímeros y obtener información de  los mecanismos de internalización empleados por estos vectores.

Innovaciones

Preparacion simple y eficiente de dendrímeros amfifilicos basados en  PAMAM mediante el uso de la adicion tipo aza-Michael de derivados de vinilsulfona que sirve como una herramienta optima para el injerto parcial de cadenas alquílicas hidrofobicas a alguno de los grupos aminos periféricos de dichos polímeros.

 

Estrategia química general y flexible que permite la funcionalización de cualquier polímero amino para la preparación de transportadores génicos sintéticos

 

Preparación de vectores génicos vasados en PAMAM con propiedades de transfección mejoradas: alta eficiencia de transfección, baja toxicidad, capacidad de mantener su eficiencia de transfección en presencia de suero y la habilidad de tranfectar diferentes líneas celulares eucarioticas.

 

Fácil preparación de vectores génicos basados en PAMAM marcados fluorescentemente para la monitorización de la internalización de tales transportadores génicos.

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